Hva HPLC måler
Væskekromatografi separerer komponenter som påvirkes ulikt av kolonnen og mobilfasen. Detektoren registrerer signaler over tid. Et integrert toppareal er et signal, ikke automatisk masse. Ulike responser, forbindelser som ikke registreres og overlappende topper kan begrense tolkningen.
Hva LC-MS tilfører
Kobling til massespektrometri gir informasjon om masse-til-ladningsforhold for ioner. Det kan støtte identifisering og, med riktig metode og kalibrering, kvantifisering. Påstanden om at MS aldri kan måle mengde er derfor feil. Omvendt er et forventet massesignal alene ikke full strukturbekreftelse.
Fire spørsmål til en metode
- Selektivitet: Kan metoden skille analytten fra andre forbindelser?
- Nøyaktighet: Hvor godt samsvarer resultatet med en referanse?
- Presisjon: Hvor mye varierer gjentatte målinger?
- Måleområde: I hvilket område er resultatene dokumentert pålitelige?
Hvorfor 99 prosent ikke er hele svaret
Et prosenttall kan være et arealforhold, et masseinnhold eller en annen beregning. Uten metode og definisjon kan disse ikke sammenlignes. Vann, salter og forbindelser med svak detektorrespons kan gjøre forskjellen viktig. Sterilitet og endotoksiner krever egne vurderinger.
Fra metode til lesbar rapport
Den kommenterte COA-en viser hvordan manglende opplysninger begrenser en konklusjon. Metodegrunnlag: ICH Q2(R2). Dette er en metodeforklaring, ikke en laboratoriegodkjenning.